一般transwell小室实验,通常将小室内称为上室,细胞培养板内称为下室,小室底部为聚碳酸酯微孔膜,在膜上铺有一层matrigel胶(基质胶)。
基质胶是从富含细胞外基质蛋白的小鼠肉瘤中提取的基质成分,主要成分包括层粘连蛋白、iv型胶原蛋白、巢蛋白和许多生长因子,基质胶在室温下会凝结成具有生物学活性的三维基质,可以模拟细胞外基质,与肿瘤细胞的体内转移类似,具有侵袭能力的细胞会分泌基质金属蛋白酶分解基质胶,并进一步向外转移。
方子业此刻,已经完成了无血清培养基与基质胶的稀释,目前在进行冰浴操作。
这个操作在冰上使用无血清培养基将基质胶按1:8左右的比例进行稀释,按100μl/孔加入上室,铺满底部,放入细胞培养箱中孵育1-4小时。
这个等待的过程,袁威宏是没有必要在这里等着的。
但四个小时之后的操作,方子业和洛听竹,就需要在这里候着。时间还算比较早。
外行看门道,内行看热闹,袁威宏见方子业的操作熟练度也还算可以,便左右看了看后,就也点了点头。
道:“你做事的时候,要稍微细心一点。”
“不懂的就和你师妹学,多问,多问一嘴是不用你花钱的。”袁威宏告诫一声,便倒背着双手就走了。
而袁威宏才走,洛听竹便有些紧张地转头问:“方师兄,你之前也进过实验室吗?怎么你这些操作,会这么熟练?”
正如袁威宏所说,她这些实验,是申请课题的前期实验,资金不多,是容不得过多失败,否则她也不求袁威宏老师来帮忙。
只是,洛听竹压根没想到,比自己更加萌新的方子业,熟练度竟然这么高。